互换人妻hd中字,国内精品久久久久影院中文字幕 ,4虎四虎永久在线精品免费,老太脱裤让老头玩ⅹxxxx,免费又黄又爽1000禁片,无码国产福利av私拍,99视频精品全部免费 在线,国产又粗又猛又爽又黄的视频在线观看动漫
歡迎來到LUMEX魯美科思分析儀器!
銷售咨詢熱線:
15010266820
Article技術文章
首頁 > 技術文章 > LUMEX毛細管電泳儀應用--CIEF方法測定人血清蛋白與干擾素α-2b融合蛋白的等電點

LUMEX毛細管電泳儀應用--CIEF方法測定人血清蛋白與干擾素α-2b融合蛋白的等電點

更新時間:2021-02-25瀏覽:2493次

 背景介紹

 

利用人血清白蛋白融合技術,制備一種在體內半衰期長,生物學活性高的長效研究重組人血清白蛋白.干擾素α2b融合蛋白,可用于病毒性肝炎,腫瘤等相關疾病的治療.重組人血清白蛋白‐干擾素α2b融合蛋白是一種新型、長效、具有抗病毒、抗腫瘤及免疫調節作用的細胞因子,其半衰期較天然的干擾素α2b長且干擾素抗體的產生時間相對較晚,在臨床上對患者的耐受性及依從性都較天然的干擾素α好。目前一些公司的同類生物制品已經進行到Ⅲ期臨床試驗階段相應的質量控制方法和質量標準都有報道。

本次實驗使用的樣品為康寶集團客戶提供的三個批次的重組人血清蛋白與干擾素α-2b融合蛋白樣品(編號:rIFNα-2b-HAS 20161101、 rIFNα-2b-HSA 20161102、 rIFNα-2b-HSA 20161203),主要進行等電點的測定實驗。

1.實驗條件

儀器:LUMEX Capel 205 毛細管電泳儀

試劑:ADVANCED CIEF STARTER KIT試劑盒,Sciex 公司生產(試劑盒包含涂層的毛細管,pI 標記物和CIEF凝膠)。

毛細管條件:長度42 cm,內徑 50 um,特殊涂層。

分析波長:280 nm

分析電壓:25 kV

分析溫度:20℃

分析時間:70 min

實驗試劑:蒸餾水、200 mM 磷酸、300 mM 氫氧化鈉、350 mM 乙酸、500 mM 精氨酸、200 mM 亞氨基二乙酸、3.75 M 尿素-Cief凝膠、尿素溶液和兩性電解質 (Pharmalyte® 3-10)。

 

2.實驗過程

實驗時,首先進行毛細管的沖洗,對于本次使用的特殊的涂層毛細管不能用氫氧化鈉等緩沖液沖液,需要用水、凝膠進行沖洗和活化。具體的試劑類型如下圖所示:       

 


進口端和出口端溶液的放置

毛細管的潤洗和分析程序如下圖所示:

毛細管的潤洗程序

分析條件

 

3.實驗結果及分析

按照上述分析條件進行分析,在分析完成后會得到兩張譜圖,一張為聚焦的譜圖,一張為分析的譜圖,分析和定量主要是通過分析譜圖。在本次實驗中主要采用了三種pI marker 5.59.5 10進行添加作為標準對于*一批次的樣品rIFNα-2b-HAS 20161101,分析圖譜如下所示:

圖中35min 左右的峰為pI為9.5 的marker的峰,51min左右的峰為pI為7.0 的marker的峰, 61 min左右的峰為5.5的marker的峰。三個marker出峰都比較明顯,其中的第三個峰為樣品的峰,遷移時間約為56 min左右。

通過*一批次三個marker 的遷移時間和pI值繪制標準曲線,曲線如下:

對于*一批的樣品,通過對樣品蛋白的積分,確定其保留時間并通過公式計算蛋白的pI值為6.05-6.14,其中大峰的pI值為6.05。

對于第二批次的樣品rIFNα-2b-HAS 20161102,分析圖譜如下所示:

圖中33min左右的峰為pI 為9.5的marker的峰,50min左右的峰為pI 為7.0 的marker的峰, 59min左右的峰為5.5的marker的峰。三個marker出峰都比較明顯,其中的第三個峰為樣品的峰,遷移時間約為55 min左右。

通過第二批次三個marker 的遷移時間和pI值繪制標準曲線,曲線如下:

對于第二批的樣品,通過對樣品蛋白的積分,確定其保留時間(54.65555.4 min)并通過公式計算蛋白的pI值為6.02-6.15,其中大峰的pI值為6.02

對于第三批次的樣品rIFNα-2b-HAS 20161203,分析圖譜如下所示:

圖中34 min 左右的峰為pI 為9.5 的marker的峰,51 min 左右的峰為pI 為7.0 的marker的峰, 60 min左右的峰為5.5的marker的峰。三個marker出峰都比較明顯,其中的第三個峰為樣品的峰,遷移時間約為55 min左右。

通過第二批次三個marker 的遷移時間和pI值繪制標準曲線,曲線如下:

9.jpg

對于第三批的樣品,通過對樣品蛋白的積分,確定其保留時間(56.5、56.9、57.3 min)并通過公式計算蛋白的pI值為6.03-6.15,其中大峰的pI值為6.03。

為了確認是否在5.5與4.1之間是否有其他的蛋白,將5種標記物都配制走樣,圖譜如下:

結果發現,在此條件下未出現明顯的其他雜質蛋白,說明蛋白相對較純。


 

郵件聯系我們:lumexcn@lumex.com.cn

掃一掃,關注微信服務號
©2025 LUMEX魯美科思分析儀器 版權所有 All Rights Reserved. 備案號:京ICP備17048930號-2
主站蜘蛛池模板: 99riav国产精品视频| 丰满少妇高潮惨叫正在播放| 精品成在人线av无码免费看| 蜜臀av片| 玩弄人妻少妇精品视频| 欧美freesex黑人又粗又大| 国精产品999国精产| 电影在线观看+伦理片| dvd碟片欧美| 真实单亲乱l仑对白视频| 亚洲人精品亚洲人成在线| 国精产品999国精产| 野花免费观看日本韩国| 天天躁夜夜躁狠狠综合| 国产熟女内射oooo| 中字幕一区二区三区乱码| 韩国久久久久久级做爰片| 久久久噜噜噜www成人网 | 午夜精品久久久久久久爽| 美女裸体18禁免费网站| 五月婷婷综合缴情六月| 99精产国品一二三产区| 四虎国产精品永久在线| 黄网站色成年片大免费高清| 日本在线看片免费人成视频| 亚洲伊人久久综合影院| 亚洲色图片区| 精品国产一区二区三区香蕉| 国模大胆一区二区三区| 日本xxx免费高清色视频在线观看| 少妇无码av无码专区线| 成人+国产+高清| 精品日韩卡1二2卡3卡4卡乱码| 国产日产欧产系列| 大bw毛毛多巨大bw大bw| 国产精品亚洲va在线| 少妇无力反抗慢慢张开双腿| 国产欧美日韩精品丝袜高跟鞋| 啦啦啦观看免费观看视频6| 日本护士体内she精2╳╳╳| 中字幕一区二区三区乱码|